Epo apa itu

Erythropoietin (juga erythropoietin Inggeris, EPO) adalah salah satu hormon buah pinggang. Oleh struktur kimia adalah glikoprotein.

Peranan fisiologi

Erythropoietin adalah perangsang fisiologi erythropoiesis. Ia mengaktifkan mitosis dan kematangan eritrosit dari sel-sel prekursor siri erythrocyte. Sekresi erythropoietin oleh buah pinggang meningkat dengan kehilangan darah, pelbagai keadaan anemia (besi, folat dan anemia yang kekurangan B12, anemia yang berkaitan dengan luka sumsum tulang, dan sebagainya), dan iskemia buah pinggang (contohnya, dengan kejutan traumatik), dengan keadaan hipoksia.

Rembesan eritropoietin oleh buah pinggang juga dipertingkatkan di bawah pengaruh glukokortikoid, yang merupakan salah satu mekanisme untuk peningkatan pesat hemoglobin dan keupayaan penyediaan oksigen dalam darah di bawah tekanan. Tahap hemoglobin dan bilangan eritrosit dalam darah meningkat dalam masa beberapa jam selepas pentadbiran erythropoietin eksogen.

Erythropoietin menyebabkan pengambilan sumsum tulang yang lebih tinggi daripada besi, tembaga, vitamin B12 dan folat, yang membawa kepada pengurangan tahap plasma besi, tembaga dan vitamin B12, serta pengurangan tahap protein pengangkutan - ferritin dan transcobalamin.

Erythropoietin meningkatkan tekanan darah sistemik. Ia juga meningkatkan kelikatan darah dengan meningkatkan nisbah jisim erythrocyte kepada plasma.

Mekanisme pembentukan erythropoietin

Faktor penentu dalam pembentukan erythropoietin adalah rejim oksigen dalam keseluruhan organisma, dan khususnya buah pinggang. Asas struktur untuk fungsi ini ialah protein-sitokrom yang mengandungi heme. Bentuk oksi protein ini menghalang pengeluaran IGF-1 (faktor yang disebabkan oleh hipoksia), yang berlaku apabila tekanan dalam buah pinggang berkurangan dari 20 hingga 40 mm Hg. Bentuk yang dikurangkan membawa kepada peningkatan dalam aktiviti IGF-1, akibatnya erythropoietin dikembangkan. Melalui pengaktifan enzim (phospholipase, yang meningkatkan aktiviti prostaglandin), pengeluaran erythropoietin dirangsang.

Mekanisme tindakan dan norma erythropoietin hormon dalam darah seseorang yang sihat

Hormon erythropoietin dihasilkan oleh sel-sel buah pinggang dan, sedikit sebanyak, oleh hati. Dia telah dikaji sejak tahun 1905, dari masa ketika Perancis Carl Paul Carnot memulakan penyelidikannya. Dia kemudian menulis karya pertama mengenai topik - erythropoietin, apa itu. Ringkasnya, ia adalah jerawat lycoprotein yang berkaitan dengan fungsi darah. Bagaimana ia berfungsi dan apa yang menyebabkan kekurangan atau kelebihannya dalam badan boleh dijumpai lebih lanjut.

Fungsi hormon

Erythropoietin dihasilkan dalam keadaan hipoksia, atau kebuluran oksigen di peringkat molekul. Selepas memasukkan otak inert, erythropoietin mencetuskan sintesis sel darah merah, atau sel darah merah. Dan sudah pun sel-sel darah merah mula menyebar ke semua organ orang yang sangat diperlukan oksigen.

Jumlah sel darah merah dalam darah sentiasa berkurang disebabkan oleh kehidupan singkat mereka, sekitar 3 bulan. Dan dengan penurunan bilangan mereka berkurang dan kandungan oksigen dalam badan. Oleh itu, hormon erythropoietin, diperlukan untuk seseorang sentiasa, untuk pembaharuan eritrosit dan mengekalkan jumlahnya dalam darah, pada tahap yang diperlukan.

Kita tidak sepatutnya melupakan kes-kes ekstrim kekurangan oksigen, contohnya, dengan kehilangan darah yang besar, atau tenaga fizikal yang ketara, apabila keperluan oksigen meningkat dengan ketara.

Anda juga perlu memahami bahawa erythropoiesis, proses pembentukan darah, tidak dapat diteruskan tanpa "bahan bangunan", dalam hal ini besi, vitamin B12 dan asid folik. Oleh itu, bersama-sama dengan EPO, seseorang harus mengambil jumlah yang mencukupi daripada unsur-unsur ini dengan makanan atau dalam bentuk tulen dalam pil atau suntikan.

Norma erythropoietin dalam darah seseorang yang sihat perlu 4.3 - 29 mIU / ml. Tetapi dengan usaha fizikal yang berpanjangan, kadar ini meningkat beberapa kali. Fenomena ini berlaku di badan atlet atau orang yang terlibat dalam buruh fizikal berat. Dalam tubuh mereka, hormon mesti dihasilkan secara berterusan dan dalam jumlah besar.

Mana-mana pelanggaran tahap erythropoietin menunjukkan bahawa terdapat beberapa jenis patologi dalam badan. Seseorang mempunyai masalah dengan buah pinggang, hati, sumsum tulang atau metabolisme. Dalam sebarang kes, ujian darah untuk erythropoietin dilakukan untuk diagnosis yang tepat dan organ dalaman diperiksa.

Ujian darah

Analisis untuk erythropoietin dilakukan untuk menentukan tanda-tanda anemia pesakit dan jenisnya. Keadaan ini dicirikan oleh kandungan sel darah merah yang rendah dan, dengan itu, erythropoietin.

Anemia boleh menjadi sederhana dan teruk. Negeri yang kedua adalah berbahaya kerana tanpa rawatan yang betul, keadaan pesakit akan bertambah buruk akibat penyakit yang terus progresif.

Analisis dilakukan secara kerap dalam kes-kes buah pinggang kronik atau penyakit hati. Pemantauan keadaan keadaan darah adalah perlu untuk mencegah kemerosotan mendadak keadaan manusia.

Dengan kandungan darah merah yang tinggi dalam darah, juga diberikan kepada analisis erythropoietin. Lagipun, penting untuk mengetahui apa yang menyebabkan lonjakan aktiviti hormon. Dan selain itu, kelimpahan sel darah merah dalam darah boleh menyebabkan trombosis, yang akhirnya dapat menyebabkan penyumbatan kapal besar dan kematian seseorang.

Erythropoietin tinggi

Peningkatan kandungan erythropoietin dengan bilangan eritrosit yang rendah, jauh lebih biasa daripada keadaan bertentangan.

Pelbagai patologi boleh menyebabkan keadaan sedemikian:

  1. Penyakit jarang adalah aplasia tulen sumsum tulang merah. Ia dicirikan oleh kandungan rendah sel darah merah, sementara tahap leukosit dan platelet tetap normal.
  2. Kehilangan darah kronik membawa kepada kandungan erythropoietin yang tinggi dalam darah. Sebagai contoh, dengan pendarahan yang lemah dari sphincter dubur atau penyakit gastrousus.
  3. Anemia boleh menyebabkan kekurangan unsur surih yang terlibat dalam pembinaan sel darah merah. Ini adalah asid folik, besi, vitamin B12. Iaitu, terdapat banyak hormon dalam sumsum tulang, tetapi tidak ada apa-apa untuk membina sel darah.
  4. Mana-mana jenis leukemia boleh berkembang di dalam badan.
  5. Sejak erythropoietin dan hormon lain dihasilkan dalam buah pinggang dan kelenjar adrenal, tahap peningkatan bahan ini dalam darah boleh disebabkan oleh penampilan tumor di buah pinggang. Secara umum, apa-apa kerosakan kepada buah pinggang membawa kepada pelanggaran tahap erythropoietin - pemogokan mampatan, pecah arteri, dan sebagainya.
  6. Tahap Erythropoietin meningkat dalam bronkitis kronik, atau penyakit virus lain.
  7. Berlebihan hormon menyebabkan kegagalan jantung dan stasis darah.

Secara umum, untuk menentukan punca tahap erythropoietin yang tinggi, seseorang mesti menjalani pemeriksaan hampir lengkap organ-organ dan kapal dalaman dengan bantuan pelbagai peralatan perubatan - ultrasound, ECG X-ray, tomografi yang dikira dan sebagainya.

Kandungan erythropoietin rendah

Kandungan erythropoietin yang rendah, adalah kurang biasa dan menyebabkan bilangan patologi yang sangat terhad:

  1. Kegagalan buah pinggang kronik, ini adalah sebab utama penurunan kandungan erythropoietin dalam darah.
  2. Prosedur dialisis juga mengurangkan kandungan erythropoietin, tetapi dalam kes ini, kadar segera dipulihkan.
  3. Dalam penyakit sum-sum tulang, iaitu percambahan, jumlah hormon dalam darah tidak memainkan peranan. Oleh itu, ia dikurangkan secara bebas.
  4. Kurangkan kandungan erythropoietin boleh menerima beberapa jenis steroid ubat.
  5. Kehamilan sering disertai dengan kandungan erythropoietin yang rendah.

Analisis Erythropoietin

Agar hasil analisis erythropoietin untuk mencerminkan gambaran sebenar, adalah perlu untuk mematuhi beberapa syarat. Sebelum analisis selama 3-5 hari, adalah perlu untuk menolak untuk mengambil ubat steroid dan hormon. Jika ini tidak mungkin mengikut kesaksian, maka juruteknik makmal perlu diberi amaran tentang perkara ini supaya dia akan membuat pembetulan yang sewajarnya apabila memecahkan keputusan. Juga, sebelum analisis tidak dapat melakukan transfusi darah atau dialisis. 2-3 hari sebelum analisis, anda perlu berhenti bermain sukan atau buruh fizikal yang keras.

Dan keadaan terakhir - semua ujian untuk hormon dilakukan pada perut kosong, termasuk erythropoietin. Jadi sebelum menderma darah, anda tidak boleh makan apa-apa selama 7-8 jam, dan anda hanya boleh minum air kosong.

Normalisasi erythropoietin

Setelah menangani masalah erythropoietin, jelaslah bahawa normalisasi parasnya dalam darah bergantung kepada rawatan patologi ketidakseimbangan hormon itu. Iaitu, selepas mengeluarkan sista dari buah pinggang, atau merawat penyakit virus, tahap hormon akan kembali normal.

Tetapi untuk mempercepatkan proses ini, farmakologi telah membangunkan beberapa ubat yang membantu menghasilkan erythropoietin lebih cepat. Atau menggantikannya, untuk tempoh terapi, dengan analog sintetik. Juga, ubat-ubatan ini ditetapkan kepada pesakit yang mempunyai anemia dan penyakit ginjal kronik. Ini boleh Epoetin, Erythrostim, Recormon atau Vero-epoetin. Semua ubat hanya ditetapkan oleh doktor, setelah mengambil semua ujian yang diperlukan dan lulus prosedur diagnostik lain.

Semua ubat yang disenaraikan ditetapkan untuk penyakit yang sangat spesifik:

  1. Dalam kegagalan buah pinggang kronik.
  2. Dengan tumor benigna atau buah pinggang adrenal. Mereka juga digunakan semasa tempoh pemulihan pesakit selepas pembedahan untuk membuang tumor.
  3. Ubat-ubatan ini termasuk dalam kompleks langkah-langkah pemulihan selepas pesakit menjalani kemoterapi.
  4. Dengan anemia jenis yang paling berbeza.
  5. Ubat ini digunakan sebagai langkah pencegahan, sebelum pembedahan, dengan kemungkinan kehilangan darah.
  6. Apabila memberi makan bayi dengan kekurangan berat badan atau prematur.

Dadah mempunyai banyak kesan sampingan, dan dengan dos yang salah atau rejimen, boleh menyebabkan akibat kesihatan.

Sekiranya seseorang mengalami sakit kepala yang teruk, rasa mual, pening, muntah, cirit-birit dan kejang hendaklah segera, pergi ke doktor.

Terdapat ubat alternatif. Mereka tidak mengandungi erythropoietin hormon tulen, tetapi epoetin beta. Jika tidak, bahan ini dipanggil glikoprotein rekombinan. Ia terdiri daripada 150 asid amino, yang membolehkannya mencipta sel darah merah dari sel-sel deterministik.

Oleh kerana komposisi ubat ini sangat mirip dengan hormon sebenar, ia boleh diberikan subcutaneously atau intravena. Kelajuan dadah tidak lebih rendah dari hormon semulajadi, yang membolehkan anda meningkatkan bukan sahaja paras sel darah merah, tetapi juga hemoglobin.

Satu lagi kelebihan beta epoetin ialah ia mengandungi besi, iaitu, bahan bangunan untuk pengeluaran sel darah merah. Oleh itu, ubat dengan beta epoetin, mendapati diri mereka bukan sahaja dalam bidang perubatan tetapi juga dalam sukan. Kerana kesan dari itu sudah ada dalam 15 selepas suntikan.

Erythropoietin dalam sukan

Kesan erythropoietin pada badan, mereka tahu dan pelatih sukan. Oleh itu, persediaan yang mengandungi hormon ini digunakan secara meluas dalam sukan. Walaupun Jawatankuasa Olimpik Antarabangsa mengiktiraf bahan-bahan ini sebagai doping kembali pada tahun 1990. Kerumitan pemantauan pematuhan dengan keperluan IOC terletak pada hakikat bahawa erythropoietin asal haiwan sangat sukar ditentukan dalam tubuh.

Tetapi selepas semua, sebenarnya, hormon ini dihasilkan dalam tubuh pada masa beban yang paling besar, yaitu, semasa pertandingan. Dia mesti berada di sana kalau tidak lelaki itu akan mati. Dan tahap yang rendahnya agak tanda yang membimbangkan, tetapi bukan norma. Tetapi terdapat kes kematian, dan dengan erythropoietin rekombinan. Beberapa penunggang basikal meninggal dunia pada penghujung tahun sembilan puluhan.

Satu cara atau yang lain, hampir mustahil untuk mengenal pasti atlet yang menyalahgunakan erythropoietin, oleh itu atlet dari seluruh dunia menggunakan ubat-ubatan yang mengandung hormon ini dengan risiko mereka sendiri, berulang kali meningkatkan kekuatan otot, dan yang paling penting - ketahanan mereka.

Epo apa itu

Erythropoietin adalah hormon glikoprotein, lebih tepatnya sitokin, pengatur utama erythropoiesis, yang merangsang pembentukan sel darah merah dari sel-sel progenitor terlambat dan meningkatkan hasil reticulocytes dari sumsum tulang, bergantung kepada penggunaan oksigen. Selagi pengoksidaan tisu tidak terjejas, kepekatan erythropoietin, serta bilangan sel darah merah yang beredar, tetap tetap. Pengeluaran Erythropoietin dikawal pada tahap transkripsi gennya, dan kerana satu-satunya rangsangan fisiologi yang meningkatkan bilangan sel-sel sintesis erythropoietin adalah hipoksia, baik produksi maupun metabolisme erythropoietin bergantung kepada kepekatan plasmanya. Dalam tubuh orang yang sihat adalah lebih kurang 2.3 * 10 ^ 13 eritrosit, jangka hayatnya adalah purata 120 hari. Akibatnya, kolam sel merah perlu sentiasa dikemas kini dalam badan pada kadar kira-kira 2.3 sel per saat. Sistem pembezaan sel erythroid perlu dikawal ketat untuk mengekalkan tahap sel darah merah yang tetap di bawah keadaan normal. Di samping itu, sistem ini mesti sangat sensitif terhadap perubahan dalam jumlah oksigen dalam badan. Pada masa ini, banyak data telah diperoleh, menunjukkan bahawa faktor utama yang mengawal pembezaan sel erythroid adalah erythropoietin yang beredar dalam darah.

Erythropoietin adalah hormon yang sangat aktif yang bertindak dalam tubuh dalam kepekatan picomolar. Fluktuasi kecil kepekatannya dalam darah membawa kepada perubahan ketara dalam kadar erythropoiesis, dan julat kepekatan normalnya adalah antara 4 hingga 26 IU / l. Oleh itu, sehingga kepekatan hemoglobin turun di bawah 105 g / l, kepekatan erythropoietin tidak melebihi julat yang ditentukan dan mustahil untuk mengenal pasti kenaikannya (melainkan jika anda mengetahui nilai awalnya). Erythrocytosis membawa kepada penindasan pengeluaran erythropoietin oleh mekanisme maklum balas negatif. Ini disebabkan bukan sahaja untuk meningkatkan bekalan oksigen ke tisu kerana peningkatan bilangan erythrocytes yang beredar, tetapi juga peningkatan kelikatan darah. Bagi atlet, ini bermakna pengurangan pengeluaran hormon mereka sendiri dengan pengenalan eksogen dan melanggar mekanisme pengawalan pengeluaran sel darah merah. Oleh itu, menggunakan erythropoietin dalam sukan sebagai doping, atlet harus berfikir tentang masa depan pengeluaran sel darah merah di dalam tubuhnya.

Ujian doping [sunting]

Sebagai peraturan, erythropoietin dikesan dalam sampel air kencing atau darah. Dalam darah dikesan dengan kebarangkalian yang lebih besar daripada dalam air kencing. Separuh hayat adalah 5-9 jam, iaitu, kebarangkalian pengesanan dikurangkan dengan ketara selepas 2-3 hari.

Heparin digunakan sebagai agen pelindung [1]. Pengenalan protease ke pundi kencing melalui kateter juga digunakan. [2]

Peranan fisiologi erythropoietin [sunting]

Untuk masa yang lama, persoalan sel yang biasanya menghasilkan erythropoietin tetap terbuka. Ini disebabkan oleh kurangnya kaedah langsung untuk mengenal pasti sel-sel yang mensintesis hormon. Sel-sel telah dikenal pasti oleh kaedah tidak langsung, termasuk keupayaan budaya tisu tertentu untuk mensintesis produk secara in vitro. Adalah dipercayai bahawa calon utama untuk peranan sel penghasil EPO adalah sel glomerular, serta sel-sel tubulus proksimal. Pengklonan gen erythropoietin, serta perkembangan kaedah hibridisasi situ, yang membenarkan pengenalpastian langsung sel-sel di mana ekspresi gen tertentu berlaku, telah mengubah pemahaman sifat sel-sel sintesis erythropoietin. Hibridisasi in situ telah menunjukkan bahawa sel-sel yang mensintesiskan erythropoietin mRNA tidak glomerular atau tubular. Rupa-rupanya, sel-sel interstitial atau sel-sel endothelial kapilari adalah tapak utama sintesis EPO di buah pinggang. Seperti yang telah dinyatakan, faktor utama yang mengawal selia pengeluaran EPO adalah hipoksia. Di bawah keadaan hypoxic, jumlah EPO yang beredar di plasma meningkat kira-kira 1000 kali dan mencapai 5-30 U / ml. Dalam pelbagai eksperimen dengan buah pinggang yang terpencil, ia telah menunjukkan bahawa ia mengandungi sensor yang bertindak balas terhadap perubahan dalam kepekatan oksigen.

Satu lagi J. Schuster dan kakitangan pada tahun 1987 menyiasat kinetik pengeluaran erythropoietin sebagai tindak balas kepada hipoksia. Telah ditunjukkan bahawa kira-kira 1 jam selepas penubuhan hipoksia, jumlah mRNA erythropoietin dalam peningkatan buah pinggang, dan mRNA terus berkumpul selama 4 jam. Apabila hipoksia dikeluarkan, tahap mRNA EPO berkurangan dengan cepat. Perubahan dalam jumlah plasma dan erythropoietin buah pinggang, yang dikesan menggunakan antibodi spesifik erythropoietin, berlaku dengan ketara selari dengan perubahan dalam jumlah mRNA dengan tempoh lag yang sepadan. Keputusan yang diperolehi dalam karya ini menunjukkan bahawa semasa hipoksia, pengeluaran EPO dirangsang de novo.

Di makmal S. Konry pada tahun 1989, proses induksi sintesis EPO dikaji menggunakan kaedah, hibridisasi in situ pada bahagian-bahagian tisu korteks buah pinggang. Telah didapati bahawa di bawah keadaan anemia, pengeluaran EPO meningkat dengan ketara, walaupun intensifikasi hibridisasi dengan mRNA EPO dalam sel individu tetap tidak berubah. Ia menunjukkan peningkatan pengeluaran EPO dikaitkan dengan peningkatan jumlah sel yang mensintesis hormon. Sebagai hematokrit biasa pulih, jumlah sel-sel sintesis erythropoietin berkurang dengan cepat, dan kinetik perubahan berkorelasi dengan kinetik mengurangkan jumlah mRNA EPO dan hormon yang beredar. Data analisis histologi menunjukkan bahawa EPO disintesis oleh sel-sel interstisial bahagian kortikal buah pinggang.

Telah ditunjukkan bahawa dari 5 hingga 15% erythropoietin plasma pada orang dewasa mempunyai asal luar biasa. Dan jika, dalam embrio, tempat utama untuk sintesis erythropoietin adalah hati, dalam organisma dewasa hati juga merupakan organ utama yang menghasilkan EPO, tetapi extrarenal. Kesimpulan ini disahkan dalam eksperimen baru-baru ini untuk mengesan mRNA EPO dalam pelbagai organ. Ternyata, perubahan dalam tapak utama sintesis EPO semasa ontogenesis adalah peristiwa genetik yang ditentukan.

Sintesis erythropoietin dalam tubuh dimediasi oleh sejumlah besar biokimia cofactors dan stimulan. Adalah diandaikan bahawa hipoksia membawa kepada penurunan tahap oksigen dalam sel-sel sensori tertentu buah pinggang, yang menyebabkan peningkatan pengeluaran prostaglandin dalam sel-sel glomerular. Prostaglandin telah terbukti memainkan peranan penting dalam merangsang pengeluaran erythropoietin. Inhibitor sintesis prostaglandin mempunyai kesan menindas pada pengeluaran EPO semasa hipoksia. Sumbangan utama kepada biosintesis prostaglandin semasa hipoksia dibuat, nampaknya, oleh sistem cyclooxygenase. Semasa hipoksia (serta pengenalan ion kobalt), protease neutral dan hydrolases lysosomal dikeluarkan di buah pinggang, yang, seperti yang ditunjukkan, juga merangsang pengeluaran EPO. Pembebasan enzim lysosomal nampaknya dikaitkan dengan peningkatan dalam pengeluaran cGMP. Telah ditunjukkan bahawa enzim lysosomal diaktifkan dengan penyertaan kinase protein, yang seterusnya diaktifkan oleh kAMP.

Semasa hipoksia, induksi aktiviti fosfolipase A2 diperhatikan, yang membawa kepada peningkatan tahap arakidonat, yang, dengan penyertaan cyclooxygenase, ditukar menjadi endoperoxida. Telah dinyatakan bahawa hypoxia adalah keadaan optimum untuk aktiviti siklooksigenase. Ia berkemungkinan bahawa sistem kalsium memainkan peranan penting dalam peristiwa biokimia ini: ion kalsium merangsang aktiviti fosfolipase A, dan pembentukan prostaglandin. Prostanoids pula dapat mendorong aktiviti siklase adenylate dan mencetuskan lekuk peristiwa biokimia yang membawa kepada fosforilasi dan pengaktifan hidrolase. Apakah peranan hydrolases dan apa rantai, yang akhirnya membawa kepada peningkatan sintesis EPO, masih tidak jelas. Sesetengah hormon sistem hipofalamus hipofisis, hormon tiroid dan beberapa hormon steroid juga mempunyai kesan merangsang pada biosintesis EPO. Pengaruh spesifik pengeluaran EPO adalah ion kobalt, mekanisme tindakan yang mana pada sistem biosintesis EPO belum jelas. Sistem ini merupakan model eksperimen yang menarik untuk mengkaji induksi biosintesis EPO.

Molekul erythropoietin manusia, di mana komponen karbohidrat menyumbang 40-50% berat molekul (berat molekul glikoprotein ialah 32-36 * 10 ^ 3 A. e M., Dan berat molekul yang diperkira bahagian protein ialah 18,399 * 10 ^ 3 a. e. m.), terdiri daripada 193 residu asid amino. Nilai titik isoelektrik EPO adalah rendah (pH 3.5-4.0), yang disebabkan oleh kehadiran asid sialik di kedudukan terminal rantai karbohidrat erythropoietin. Isoelektrik yang memfokuskan EPO plasma dalam gel polyacryamide memungkinkan untuk mengenal pasti beberapa pecahan yang sama dalam berat molekul tetapi berbeza dengan saiz titik isoelektrik mereka, yang menunjukkan heterogenitas dalam struktur bahagian karbohidrat hormon itu. Pembelahan asid sialik semasa rawatan dengan neuraminidase atau semasa hidrolisis asid menyebabkan kehilangan kestabilan hormon dalam vivo, tetapi tidak menjejaskan aktiviti in vitro. Dalam empat lamanya, residu glikosidik dilampirkan pada rantaian protein, yang boleh mewakili gula yang berlainan, oleh itu terdapat beberapa jenis EPO dengan aktiviti biologi yang sama, tetapi agak berbeza dalam sifat fizikokimia mereka.

Sebagai hasil daripada analisis asid amino erythropoietin manusia, tiga tapak N-glikosilasi berpotensi telah dikenalpasti, termasuk urutan konsensus Asn-X-Ser / Thr. Dalam eksperimen pada rawatan hormon dengan N-glycosidase, khususnya mengekalkan rantai oligosakarida yang dikaitkan dengan residu asparagine oleh ikatan N-glikosida, ia telah mengesahkan bahawa terdapat tiga tapak N-glikosilasi dalam molekul EPO. Hasil daripada percubaan pada rawatan hormon dengan O-glikosidase, ia telah ditetapkan bahawa ia juga mengandungi rantai oligosakarida yang dikaitkan dengan bahagian protein oleh ikatan O-glikosid.

Gen erythropoietin (Gen: [07q21 / EPO) erythropoietin) terdiri daripada lima ekson dan empat intron. Gen mengodkan protein yang terdiri daripada 193 residu asid amino. Mengesan empat jenis RNA yang terlibat dalam interaksi dengan gen erythropoietin, dan dua jenis diwakili dalam ekstrak selepas pengenalan kobalt klorida dengan jumlah salinan yang lebih kecil daripada ekstrak normal. Data ini menunjukkan kehadiran faktor-faktor pengawalseliaan negatif (mungkin ribonukleoprotein) yang terlibat dalam mengawal selia ekspresi gen erythropoietin. Anggapan peraturan negatif ekspresi gen EPO disahkan oleh Semenza G. dan kakitangan pada tahun 1990, yang menerima satu siri tikus transgenik yang membawa bahagian pengekodan gen EPO manusia dan pelbagai serpihan rantau S-flanking. Analisis ekspresi gen dalam pelbagai transgen memungkinkan untuk mengenal pasti tiga elemen pengawalseliaan gen erythropoietin manusia:

  • elemen pengawalseliaan positif yang diperlukan untuk mendorong ekspresi gen erythropoietin dalam hati;
  • unsur pengawalseliaan negatif;
  • elemen pengawalseliaan yang diperlukan untuk ekspresi gen yang terdedah dalam buah pinggang.

Ia secara eksperimen menunjukkan bahawa terdapat dua tapak inisiasi untuk transkripsi gen erythropoietin yang membawa banyak tapak permulaan. Di bawah keadaan biasa, inisiasi transkripsi berlaku dari sejumlah laman web yang terletak di kedua-dua tapak. Apabila induksi anemia atau rawatan dengan kobalt klorida, jumlah tapak permulaan transkripsi yang berfungsi di kedua-dua tapak meningkat. Dalam semua kes, penyediaan erythropoietin adalah terhad oleh kesulitan yang berkaitan dengan pengasingan dan penanaman sel, ketidakstabilan pengeluaran hormon, dan akhirnya, kepekatan yang rendah dalam cecair budaya.

Pendekatan fundamental yang berbeza untuk mendapatkan jumlah besar EPO yang sangat murni dikaitkan dengan penggunaan kaedah gen dan kejuruteraan sel. Percubaan dibuat untuk menghasilkan penghasil bakteria erythropoietin. Protein yang dihasilkan di Escherichia coli diiktiraf oleh antibodi terhadap EPO dan mempunyai berat molekul kira-kira setara dengan EPO manusia deglykosilasi. Adalah diketahui bahawa sel bakteria mempunyai sistem glikosilasi yang pada asasnya berbeza daripada eukariotik. Oleh itu, adalah mustahil untuk mendapatkan protein glikosilat dengan betul dalam sel-sel bakteria. Dalam kes EPO, mendapatkan glikoprotein glikosilasi yang betul adalah penting. Oleh itu, penciptaan penghasil hormon berdasarkan sel-sel bakteria adalah tidak praktikal. Pengeluar aktif secara biologi baik secara in vitro dan vivo erythropoietin hanya boleh didapati berdasarkan sel-sel haiwan yang lebih tinggi.

Dalam kajian sifat-sifat EPO rekombinan, ditunjukkan bahawa kehadiran komponen karbohidrat yang tidak lengkap (berat molekul erythropoietin disintesis dalam sistem ini adalah 23 * 10 ^ 3 a.e. m) tidak menjejaskan aktiviti hormon in vitro, tetapi dengan ketara mengurangkan aktiviti dalam vivo. Pada masa yang sama, penyingkiran lengkap bahagian karbohidrat dengan bantuan glikosidases membawa kepada kehilangan 80% aktiviti biologi hormon dalam ujian in vitro. Data-data ini bertentangan dengan idea-idea yang sedia ada yang komponen karbohidrat EPO tidak diperlukan untuk kegiatannya secara in vitro.

Latar belakang sejarah [sunting]

Pada tahun 1989, analisis terperinci mengenai struktur EPO rekombinan, yang diperoleh dengan mengangkut sel-sel dari ovarium hamster Cina ke dalam genom EPO manusia, telah dijalankan. Adalah ditubuhkan bahawa dua jenis EPO (dipanggil bi- dan tetra-bentuk) disintesis dalam sel-sel, berbeza dengan tahap cawangan rantai karbohidrat yang berkaitan N. Bi-bentuk EPO yang mengandungi komponen karbohidrat kurang bercabang berbeza dengan ketara dalam aktiviti biologi daripada erythropoietin asli yang digunakan sebagai piawai: aktiviti biologi EPO bi-bentuk dalam vivo adalah 7 kali lebih rendah dan in vitro 3 kali lebih tinggi. Aktiviti biologi tetra-bentuk EPO sangat dekat dengan aktiviti EPO asli. Data ini menunjukkan peranan penting struktur komponen karbohidrat untuk aktiviti biologi erythropoietin dalam vivo. Ternyata, aktiviti in vitro yang lebih tinggi daripada bentuk-bentuk erythropoietin, yang mengandungi komponen karbohidrat yang tidak lengkap, dikaitkan dengan memudahkan interaksi erythropoietin dengan reseptor. Pada masa yang sama, nampaknya ia adalah komponen karbohidrat yang memastikan kestabilan hormon dalam badan dan tahap aktiviti biologi yang sama dalam ujian vivo.

Menjelang pertengahan 1980-an, erythropoietin rekombinan pertama diperolehi dengan memperkenalkan gen EPO manusia (diletakkan pada manusia pada kromosom ketujuh di kawasan 11q-12q) ke dalam hamster ovari. P-EPO manusia rekombinan yang diperolehi oleh kejuruteraan genetik (recormon) adalah sama dengan komposisi asid amino kepada EPO semulajadi manusia. Recormon menyediakan kaedah yang fleksibel dan ekonomik untuk mengubati anemia dengan berkesan dengan profil keselamatan yang tinggi dan toleransi yang sangat baik. Melalui penggunaan Recormon, keperluan untuk pemindahan darah, yang merupakan kaedah paling biasa untuk membetulkan anemia, berkurang dengan ketara. Oleh itu, menurut banyak kajian, penggunaan Recormon membolehkan pemulihan paras hemoglobin normal dan menghapuskan keperluan untuk pemindahan darah pengganti pada pesakit kanser yang mengalami anemia. Pada masa yang sama, terdapat peningkatan yang signifikan dalam kualiti hidup pesakit-pesakit ini; Risiko jangkitan, yang wujud apabila anemia diperbetulkan dengan bantuan pemindahan darah semasa rawatan penyakit berjangkit virus seperti HIV dan hepatitis C, berkurangan dengan ketara. Recormon dihasilkan sebagai alat mudah untuk mentadbir dan menunjukkan dadah (jarum picagari).

Walau bagaimanapun, terdapat perbezaan kecil dalam komposisi residu glikosid yang mempengaruhi sifat-sifat fiziko-kimia molekul keseluruhan hormon. Sebagai contoh, perbezaan tertentu didapati dalam pengagihan caj elektrik untuk jenis erythropoietin individu. Persediaan Erythropoietin dihasilkan oleh pelbagai syarikat farmaseutikal dalam lima jenis: alpha, beta, retard (NESP), theta, dan omega).

Sejak tahun 1988, alpha-EPO dan beta-EPO telah digunakan. Apabila subcutaneously, bioavailabiliti mereka adalah kira-kira 25%, kepekatan maksimum dalam darah - dalam 12-18 jam, separuh hayat - sehingga 24 jam (dengan pentadbiran intravena - 5-6 jam). Erythropoietin retard (NESP) telah digunakan untuk beberapa tahun kebelakangan ini, dan lebih tahan lama daripada ubat-ubatan EPO yang lain. Theta-EPO hari ini dianggap sebagai yang paling berkesan dan kurang alergenik, mempunyai tahap kesucian tertinggi. Ini disebabkan oleh fakta bahawa ia diperolehi oleh kaedah kejuruteraan genetik dalam sel manusia (beberapa atlet yang tidak bertanggungjawab dan doktor sukan percaya bahawa ini menjadikannya tidak dapat dikesan). Malah, theta-EPO hanya 99% yang serupa dengan manusia. Omega-EPO, yang diperolehi daripada buah pinggang hamster, berbeza daripada semua persediaan EPO yang lain dari manusia, oleh itu ia adalah yang paling mudah untuk diesan. Dijual hanya di Eropah Timur dan Amerika Selatan.

Persediaan Erythropoietin [sunting]

Komponen bio-analogi dari EPO dari pengeluar yang berlainan, walaupun dengan pendapat positif terhadap Jawatankuasa Agensi Obat-Ubat Badan Medis untuk Penggunaan Manusia (CHMP), mempunyai ciri-ciri yang berbeza, tahap kesucian dan, yang paling penting, mempunyai aktiviti biologi yang berbeza. Apabila persiapan erythropoietin dari pengeluar yang berbeza dianalisis, dalam 5 daripada 12 produk yang dikaji terdapat penyimpangan yang ketara dalam kekuatan tindakan antara siri yang berbeza, dalam tiga sampel - tahap endotoxin bakteria yang tidak boleh diterima.

Satu lagi kajian adalah untuk membandingkan 11 persiapan EPO (diperolehi daripada lapan pengeluar), yang diwakili di pasaran bukan EU dan, dari segi kandungan, potensi dan komposisi isoform dari bahan aktif (erythropoietin). Bioaktiviti in vitro bervariasi antara 71-226%, manakala prestasi 5 sampel tidak memenuhi spesifikasi. Antara penyimpangan dalam komposisi isoform dinamakan: kehadiran satu atau lebih tambahan berasid dan (atau) isoform asas, serta bahagian yang diubah suai daripada isoforms yang berbeza. Perbezaan antara siri juga dikenalpasti; Sesetengah produk tidak memenuhi spesifikasi mereka sendiri, iaitu pengeluar tidak memberikan kawalan yang memadai terhadap proses pengeluaran. Jumlah bahan aktif juga tidak selaras dengan yang dinyatakan. Penyimpangan sedemikian dari parameter yang dinyatakan mungkin pentingnya klinikal, kerana mereka boleh menyebabkan berlebihan atau, sebaliknya, pengenalan dosis yang lebih rendah. Data-data ini dengan jelas menunjukkan ancaman menggunakan erythropoietin rekombinan tanpa tanda-tanda perubatan.

Penggunaan perubatan [sunting]

Dalam amalan perubatan, erythropoietin digunakan untuk merawat anemia pelbagai asal, termasuk pesakit kanser, pesakit yang mengalami kegagalan buah pinggang kronik. Oleh kerana, seperti yang dinyatakan di atas, di dalam erythropoietin endogenus dibentuk di buah pinggang, pesakit yang mengalami kegagalan buah pinggang kronik selalu mengalami anemia. Di samping itu, penurunan kepekatan EPO dalam plasma darah manusia dan, dengan itu, bilangan eritrosit, dilihat dalam keadaan dan penyakit patologi berikut:

  • polycythemia secondary;
  • rangsangan EPO sendiri;
  • penyakit buah pinggang yang berbahaya (hidronephrosis);
  • hipoksia tisu umum;
  • Bekalan darah buah pinggang terjejas
  • mengurangkan tumpuan oksigen dalam persekitaran;
  • penyakit pulmonari obstruktif kronik;
  • penyakit sistem kardiovaskular (pembuangan darah dari kanan ke kiri);
  • kelainan struktur molekul hemoglobin (anemia sel sabit);
  • kesan pada badan oksida karbon, disebabkan oleh merokok;
  • arteriosklerosis arteri buah pinggang;
  • penolakan pemindahan;
  • aneurisme buah pinggang.

Sebelum kemunculan erythropoietin rekombinan, hematransfusi kedua-dua keseluruhan darah dan jisim erythrocyte sering dilakukan pada pesakit tersebut. Walau bagaimanapun, sejak 1989, keperluan untuk prosedur sedemikian telah hilang, kerana ia telah digantikan dengan pengenalan persiapan erythropoietin. Dalam sesetengah kes, anemia asal lain juga berjaya dirawat dengan EPO rekombinan. Hakikat bahawa pengenalan EPO rekombinan menginduksi erythropoiesis tambahan walaupun dengan tahap endogen EPO yang sepenuhnya utuh digunakan oleh penderma darah autologous. Sebagai alternatif kepada pemindahan darah sel darah merah, terapi EPO dos yang tinggi terbukti sebagai langkah anti-anemia yang berkesan sebagai terapi yang menyertainya dalam rawatan polyarthritis kronik, AIDS, beberapa tumor, serta dalam beberapa campur tangan pembedahan. Permulaan hipertensi sebagai kesan sampingan dalam penggunaan terapi EPO rekombinan kekal tidak jelas. Apabila hemodialisis dilakukan pada pesakit, persiapan erythropoietin biasanya diberikan secara intravena. Dalam sesetengah kes, ubat yang sama boleh disuntik subcutaneously.

Peningkatan bilangan eritrosit di bawah pengaruh erythropoietin, seterusnya, membawa kepada peningkatan dalam kandungan oksigen per unit volum darah dan, dengan itu, meningkatkan keupayaan oksigen penghantaran darah dan oksigen ke tisu. Akhirnya, meningkatkan stamina badan. Kesan yang sama dicapai semasa sesi latihan di pergunungan pertengahan, apabila kekurangan oksigen di udara menyebabkan keadaan hipoksia, yang merangsang penghasilan EPO endogen. Sememangnya, berbanding dengan penggunaan ubat rekombinan, latihan hipoksik merupakan mekanisme fisiologi untuk mengawal erythropoiesis dan meningkatkan fungsi pengangkutan oksigen hemoglobin, yang sebenarnya bertujuan menggunakan EPO sebagai doping.

Oleh sebab kesan erythropoietin pada kapasiti oksigen dan pengangkutan oksigen dalam tisu, bahan ini menyebabkan peningkatan dalam kapasiti kerja dalam sukan dengan manifestasi manifestasi ketahanan aerobik. Disiplin sukan sedemikian termasuk semua jenis olahraga yang berlari, dari 800 m, serta semua jenis ski dan berbasikal merentas desa. Di samping itu, baru-baru ini, dalam penerbitan bina badan, maklumat mula menunjukkan bahawa EPO dapat menggantikan penggunaan steroid anabolik secara besar-besaran. Persediaan EPO digunakan dalam kombinasi dengan stanazolol, insulin dan hormon somatotropik (STH) -

Persiapan Erythropoietin dapat diterima dengan baik oleh agen farmakologi yang tidak mempunyai kesan sampingan. Walau bagaimanapun, penggunaan EPO yang berlebihan dan penggunaan yang tidak terkawal boleh menyebabkan peningkatan kelikatan darah dan, oleh itu, peningkatan risiko gangguan dalam sistem peredaran darah, sehingga trombosis vaskular dan embolisme paru-paru, biasanya membawa maut. Risiko kesan sampingan EPO meningkat semasa latihan di kawasan tengah, serta dehidrasi.

Walau bagaimanapun, terdapat bukti bahawa penggunaan jangka panjang ubat erythropoietin boleh membahayakan kesihatan, dan kadang-kadang hidup. Khususnya, dengan menggunakan EPO mengikat sakit kepala yang berterusan pada atlet, berkembang akibat penebalan darah dan peredaran darah yang merosot di otak. Di samping itu, metabolisme besi mungkin terganggu: keperluan tubuh untuk meningkat apabila terdapat jumlah yang agak kecil dalam hati. Dengan pengenalan besi eksogen, ia mula didepositkan ke dalam hati, akibatnya sirosis yang dikaitkan dengan lebihan besi muncul dalam 20-25 tahun.

Erythropoietin dalam sukan [sunting]

Sejarah penggunaan erythropoietin rekombinan dalam sukan (singkatan rHuEPO, r-HuEPO, rhu-EPO, rEPO) yang biasa digunakan dalam kesusasteraan saintis bermula pada tahun 1977, apabila erythropoietin disucikan dari urin manusia untuk kali pertama. Pengenalan dan kawalan erythropoietin dalam sukan dan persaingan sebagai ubat yang dilarang telah melalui langkah-langkah berikut:

  • 1985 - gen EPO diklon;
  • 1987 - erythropoietin rekombinan menjadi tersedia di Eropah untuk kali pertama;
  • 1987-1990 - beberapa kematian di kalangan penunggang Belanda dan Belgium dikaitkan dengan penggunaan EPO;
  • 1988 - Persekutuan Ski Antarabangsa termasuk erythropoietin dalam senarai doping;
  • 1989 - FDA (Pentadbiran Makanan dan Dadah - badan kerajaan yang mengawal pengeluaran dan pengedaran dadah di negara ini) membenarkan pengeluaran EPO rekombinan;
  • 1990 - penggunaan erythropoietin dilarang oleh IOC;
  • 1993-1994 - IAAF, dengan penyertaan aktif Profesor M. Donike, melaksanakan prosedur untuk sampel darah di lapan pertandingan di Piala Dunia;
  • 1997 - Kesatuan Berbasikal Antarabangsa dan Persekutuan Ski Antarabangsa meluluskan prosedur ujian darah selektif sebelum permulaan pertandingan, menetapkan hematokrit maksimum dan tahap hemoglobin yang dibenarkan. Walaupun lebihan indikator yang ditetapkan bukanlah sebab untuk hilang kelayakan, bagaimanapun, prosedur ini bertujuan untuk melindungi tubuh atlet dari terjadinya komplikasi yang mungkin berkaitan dengan hemoglobin dan hematokrit yang tinggi;
  • 1998 - Mengekalkan penggunaan erythropoietin dalam sukan, pada perlumbaan berbasikal Tour de France, dilaporkan secara meluas oleh media;
  • 1999 - Intensifikasi penyelidikan untuk membangunkan kaedah yang boleh dipercayai untuk mengesan EPO untuk Sukan Olimpik di Sydney.

Oleh kerana erythropoietin semulajadi dan rekombinan mempunyai struktur asid amino yang hampir sama, erythropoietin rekombinan sangat sukar untuk dibezakan daripada analog fisiologinya.

Untuk merangsang rembesan erythropoietin sendiri di Rusia, pengoksidaan xenon digunakan secara aktif. Pada Sukan Olimpik Sochi 2014, ramai atlet Russia menerima penyedutan xenon sebelum permulaan pertandingan. Kaedah ini telah diharamkan oleh agensi anti-doping sejak Mei 2014.

Kawalan doping [sunting]

Arsenal kaedah moden yang direka untuk menentukan erythropoietin termasuk pendekatan langsung dan tidak langsung. Kaedah langsung adalah berdasarkan pengenalpastian perbezaan-perbezaan kecil yang didapati dalam kajian erythropoietin endogenik semulajadi dan EPO, yang diperoleh dengan kaedah kejuruteraan genetik. Khususnya, sesetengah penyelidik cuba menggunakan perbezaan dalam pengagihan caj elektrik, yang ditubuhkan untuk kedua-dua jenis molekul EPO. Berdasarkan perbezaan ini, percubaan dibuat untuk memisahkan dua jenis molekul menggunakan elektroforesis kapilari. Dan walaupun pemisahan sedemikian mungkin pada dasarnya, ini memerlukan jumlah urin yang besar (sehingga 1 liter, yang, untuk alasan yang jelas, tidak dapat diterima untuk amalan).

Keutamaan diberikan kepada kaedah tidak langsung yang hanya memerlukan jumlah kecil darah atau sampel air kencing. Contoh kaedah tidak langsung untuk mengesan EPO adalah seperti berikut:

  • penyimpangan dari tahap normal dalam sampel bio-persekitaran. Fakta ini bermaksud bahawa kelebihan yang ditetapkan di peringkat EPO mestilah berbeza daripada variasi fisiologi atau patologi. Walau bagaimanapun, penggunaan kriteria ini hanya mungkin jika julat turun naik penunjuk agak sempit berbanding nilai-nilai yang dijumpai selepas pentadbiran eksogen dadah. Yang terakhir hanya mungkin apabila menggunakan darah sebagai sampel untuk ujian doping;
  • Pendaftaran parameter biokimia, nilai yang bergantung kepada kepekatan erythropoietin. Pendekatan sedemikian boleh berdasarkan pengukuran kandungan reseptor transferrin larut (sTfR) dalam serum, tahap yang meningkat selepas pengenalan EPO rekombinan. Walau bagaimanapun, penunjuk ini mengalami perubahan yang sama selepas latihan dalam keadaan gunung tengah;
  • penentuan dalam urin produk pecahan fibrin dan fibrinogen selepas pentadbiran EPO.

Pada masa ini, hampir mustahil untuk mengenal pasti kes-kes eksperimen eksogen erythropoietin dalam badan. Oleh itu, perubahan parameter fisiologi darah yang dikesan selepas pentadbiran EPO digunakan untuk mengawal. Jadi, Kesatuan Berbasikal Antarabangsa menggunakan kriteria nilai hematokrit maksimum (50% untuk lelaki). Persekutuan Ski Antarabangsa sebagai kriteria menetapkan nilai hemoglobin maksimum yang dibenarkan (165 g / l untuk wanita dan 185 g / l untuk lelaki), serta tingkat retikulosit tidak lebih dari 0.2%. Sekiranya melebihi nilai had yang ditentukan semasa prosedur kawalan sebelum pertandingan, atlet yang sepatutnya akan digantung dari penyertaan dalam pertandingan untuk melindungi kesihatan. Walau bagaimanapun, kedua hemoglobin dan hematokrit adalah petunjuk yang dipengaruhi oleh banyak faktor. Khususnya, kedua-dua penunjuk ini boleh berubah dengan ketara walaupun selepas satu sesi ketahanan jumlah purata. Di samping itu, petunjuk ini dicirikan oleh kepelbagaian individu yang ketara. Oleh itu, lebihan nilai hematokrit lebih daripada 50% tidak dapat dijadikan bukti penyalahgunaan erythropoietin dalam sukan.

Untuk meningkatkan kawalan ke atas penggunaan ubat erythropoietin sebagai doping, WADA memperkenalkan modus pengurusan pasport atlet. Pasport darah adalah salah satu perkembangan WADA, yang bertujuan terutamanya mengenal pasti erythropoietin dan analognya. Dengan bantuannya, profil hematologi komputer seragam bagi setiap atlet dibentuk dalam 30 petunjuk yang berbeza, untuk permulaan, dalam sukan yang memerlukan ketahanan. Sudah 10 negara telah menyertai pengenalan dan penyempurnaan program pasport darah, termasuk Sweden, Norway, Kanada dan Jerman. Agensi Anti Doping Rusia meluluskan inisiatif ini, tetapi akan melaksanakannya selepas pemudahan semua aspek perubatan dan undang-undang.

Bagi ujian yang dijalankan ke atas pasport darah seorang atlet, WADA mengesyorkan penggunaan peralatan dari Sysmex (Jepun) atau anak syarikat ERMA. Penganalisis hematologi jenama automatik generasi terbaru ini telah memenangi indeks keyakinan maksimum dalam ketepatan penunjuk darah.

Semasa tempoh latihan intensif dan sukan profesional, perlu sentiasa menjalankan analisis hematologi untuk menentukan bilangan sel darah merah dan parameter mereka (jumlah, ketepuan dengan hemoglobin), tahap hemoglobin dan hematokrit. Hematocrit tidak boleh dibenarkan naik melebihi 50% - ini menyebabkan penebalan darah, yang seterusnya, penuh dengan peredaran mikro dalam otot dan organ dalaman, meningkatkan risiko trombosis (kecenderungan untuk trombophilia dapat dinilai oleh penanda D-dimer). Di samping itu, pengawalan metabolisme besi (kepekatan besi serum, kapasiti mengikat besi dan total tidak tepu, peratusan ketepuan besi, transferrin, ferritin, protein C-reaktif) dan penentuan tahap asid folik dan vitamin B12 dalam darah diperlukan. Semua sebatian ini diperlukan untuk erythropoiesis yang betul dan kekurangan mereka tidak boleh dibenarkan semasa sukan. Sebagai tambahan kepada ujian di atas, diperlukan kawalan tahap erythropoietin.

Lihat juga [edit]

Amaran [sunting]

Ubat anabolik boleh digunakan hanya pada preskripsi dan kontraindikasi pada kanak-kanak. Maklumat yang diberikan tidak memanggil penggunaan atau pengedaran bahan yang berpotensi dan bertujuan semata-mata untuk mengurangkan risiko komplikasi dan kesan sampingan.

Epo apa itu

Erythropoietin sebagai dadah

Apa itu erythropoietin? Erythropoietin (EPO) adalah hormon glikopeptida yang mengawal pembentukan sel darah merah (erythrocytes) dari sel stem sumsum tulang bergantung kepada penggunaan oksigen. Erythropoietin sendiri terutamanya dihasilkan oleh tisu buah pinggang.

Molekul Erythropoietin terdiri daripada asid amino. Dalam empat tapak, serpihan glikosidik dilekatkan pada rantai protein dengan cara yang sesuai. Mereka adalah gula yang berlainan, jadi terdapat beberapa jenis EPO dengan aktiviti biologi yang sama, tetapi agak berbeza dalam sifat fizikokimia mereka.

Rekombinan (sintetik), erythropoietin manusia, yang diperolehi oleh kejuruteraan genetik (singkatan rHuEPO, r-HuEPO, rhuEPO, rEPO) yang lazim digunakan dalam kesusasteraan saintifik, adalah serupa dengan komposisi asid amino kepada EPO manusia semulajadi. Walau bagaimanapun, terdapat perbezaan kecil dalam komposisi serpihan glikosid. Perbezaan ini menentukan sifat berasas berasaskan seluruh molekul hormon.

1977 Buat pertama kalinya, EPO dalam bentuk yang disucikan diasingkan dari air kencing manusia.

1988 Mula pengeluaran siri EPO rekombinan.

1988-1990 Beberapa kematian di kalangan penunggang Belanda dan Belgium dikaitkan dengan penggunaan EPO.

1990 Penggunaan EPO adalah dilarang oleh IOC.

1993-1994 IAAF melaksanakan prosedur pensampelan darah di lapan peringkat Grand Prix.

1998 Pendedahan penggunaan EPO di perlumbaan Basikal Tour de France secara meluas diliputi oleh media.

Tindakan EPO. EPO merangsang penukaran reticulocytes ke dalam eritrosit matang dalam komposisi kuman sumsum tulang hematopoietik. Peningkatan bilangan sel darah merah membawa peningkatan dalam kandungan oksigen per unit jumlah darah dan, dengan itu, meningkatkan kapasiti oksigen dan penghantaran oksigen ke tisu. Akhirnya, meningkatkan stamina badan. Kesan yang sama dicapai semasa latihan di kawasan tengah.

Untuk tujuan apa rhEPO digunakan dalam perubatan? Dalam badan, EPO dibentuk di buah pinggang. Oleh itu, pesakit yang mengalami kegagalan buah pinggang kronik selalu mengalami anemia. Sebelum kemunculan EPO rekombinan, pemindahan darah kedua-dua sel darah dan sel darah merah selalu dilakukan pada pesakit tersebut. Walau bagaimanapun, sejak tahun 1989, keperluan untuk prosedur sedemikian telah hilang, kerana mereka telah digantikan dengan pengenalan persiapan EPO. Dalam sesetengah kes, anemia asal lain juga berjaya dirawat dengan EPO rekombinan. Sebagai alternatif kepada pemindahan sel darah merah, terapi dengan dos EPO yang tinggi adalah langkah anti-anemia yang berkesan dalam rawatan polyarthritis kronik, AIDS, tumor tertentu, serta semasa campur tangan pembedahan dan kehilangan darah.

Di mana sukan adalah EPO rekombinan digunakan sebagai doping? Oleh sebab kesan EPO ke atas keupayaan oksigen darah dan penghantaran oksigen ke tisu, ubat ini menyumbang kepada peningkatan prestasi dalam sukan yang memerlukan daya tahan aerobik - semuanya adalah jenis olahraga yang beroperasi dari 800 m, serta perlumbaan ski dan berbasikal.
Apakah tahap risiko yang disebabkan oleh penggunaan EPO rekombinan? Rh-EPO adalah ubat farmakologi yang boleh diterima dengan baik yang tidak mempunyai sebarang kesan sampingan. Walau bagaimanapun, penggunaan EPO yang berlebihan dan penggunaan yang tidak terkawal boleh menyebabkan peningkatan kelikatan darah dan, dengan itu, kepada peningkatan risiko gangguan dalam sistem pembekalan darah vaskular jantung dan otak. Risiko kesan sampingan EPO meningkat semasa latihan di kawasan tengah, serta dehidrasi.

Adakah mungkin untuk mengesan kesan penggunaan EPO rekombinan?

Pada masa ini, tiada kaedah yang terbukti untuk mengesan kesan jejak penggunaan EPO oleh atlet sebagai doping. Oleh kerana erythropoietins semulajadi dan rekombinan mempunyai struktur asid amino yang sama, rh-EPO hampir tidak boleh dibezakan dari rakan sejawatannya.

Senjata moden kaedah untuk menentukan EPO termasuk pendekatan langsung dan tidak langsung. Kaedah langsung adalah berdasarkan pemisahan EPO semulajadi dan EPO, yang diperolehi oleh kaedah kejuruteraan genetik, berdasarkan perbezaan kecil yang didapati dalam kajian mereka. Khususnya, kaedah pemisahan elektroforetik dapat menunjukkan pembahagian pelbagai isoforms erythropoietin yang mempunyai serpihan glikosida yang berbeza. EPO semulajadi dikaitkan dengan molekul glikosidik dengan keasidan yang lebih tinggi, manakala molekul rekombinan dikaitkan dengan moieties yang mempunyai sifat alkali. Kaedah pembersihan sampel air kencing dan pemisahan itu sendiri agak rumit dan memerlukan sejumlah besar air kencing (sehingga 1 liter). Hasilnya, keutamaan kini diberikan kepada kaedah tidak langsung yang hanya memerlukan jumlah kecil darah atau sampel air kencing.

Contoh pengesanan EPO secara tidak langsung:

  • Penyimpangan dari tahap kandungan normal dalam biofluid. Fakta ini bermaksud bahawa kelebihan yang ditetapkan di peringkat EPO mestilah berbeza daripada variasi yang dibenarkan dari sifat fisiologi atau patologi. Walau bagaimanapun, penggunaan kriteria ini hanya mungkin jika julat turun naik penunjuk adalah kecil berbanding dengan nilai-nilai yang dijumpai selepas pentadbiran eksogen dadah. Yang terakhir hanya mungkin apabila menggunakan darah sebagai sampel untuk ujian doping.
  • Pendaftaran parameter biokimia, nilai yang bergantung kepada kepekatan EPO. Pendekatan sedemikian boleh berdasarkan pengukuran kandungan reseptor transferrin larut (sTfR) dalam serum, tahap yang meningkat selepas pengenalan EPO rekombinan. Walau bagaimanapun, penunjuk ini mengalami perubahan yang sama selepas latihan dalam keadaan pergunungan pertengahan.
  • Penentuan dalam air kencing produk degradasi fibrin dan fibrinogen selepas pentadbiran EPO.

Kawalan doping terhadap kes penyalahgunaan EPO.

Pada masa ini, hampir mustahil untuk mengenal pasti kes-kes pentadbiran eksogen EPO ke dalam badan. Oleh itu, untuk kawalan awal, perubahan parameter fisiologi darah yang dikesan selepas pentadbiran EPO digunakan. Oleh itu, Kesatuan Berbasikal Antarabangsa menggunakan kriteria nilai hematokrit maksimum (50% mengikut jumlah untuk lelaki). Persekutuan Ski Antarabangsa telah menetapkan nilai hemoglobin maksimum (16.5 g% untuk wanita dan 18.5 g% untuk lelaki) sebagai kriteria sedemikian.

Sekiranya melebihi nilai had yang ditentukan semasa prosedur kawalan sebelum pertandingan, atlet yang sepatutnya akan digantung dari penyertaan dalam pertandingan untuk melindungi kesihatannya. Walau bagaimanapun, kedua hemoglobin dan hematokrit adalah petunjuk yang dipengaruhi oleh banyak faktor.

Khususnya, mereka boleh berubah dengan ketara walaupun selepas satu latihan pada ketahanan jumlah purata. Di samping itu, petunjuk ini dicirikan oleh kepelbagaian individu yang ketara. Oleh itu, walaupun lebihan nilai hematokrit lebih daripada 50% secara volum tidak boleh digunakan sebagai bukti penyalahgunaan EPO.